NK-клетки или естественные киллеры. Морфологически сходны с лимфоцитами. Близки к ним по происхождению. Однако крупнее их и содержат множество цитоплазматических вакуолей. Обладают цитотоксической функцией. Распознают чужеродные или измененные собственные клетки с помощью механизма, отличающегося от механизма, используемого Т-лимфоцитами.
NK-клетки - большие зернистые лимфоциты с характерной морфологией: основная часть обильной цитоплазмы содержит несколько митохондрий, свободные рибосомы с отдельными элементами шероховатого эндоплазматического ретикулума, аппарат Гольджи и характерные электроноплотные гранулы, связанные с мембраной. Большие зернистые лимфоциты с активностью нормальных киллеров выполняют цитотоксические функции, также как и цитотоксические T- лимфоциты.
Основное назначение НК-клеток - уничтожение повреждённых или инфицированных клеток организма (они убивают опухолевые и заражённые вирусами клетки).
Активные НК-клетки появляются уже через двое суток после заражения хозяина вирусом. Низкая активность НК-клеток несёт в себе повышенный риск развития таких заболеваний, как рак.
Численность нормальных киллеров (NК-клеток) в организме человека (лимфоциты периферической крови) – около 5%. Для NК характерны неперестроенное (гаметное) расположение генов с фенотипом CD3-CD16+CD56+CD94+ . Как видим, нормальные киллеры не имеют маркеров В- и Т-лимфоцитов, хотя и являются лимфоидным клетками.
Предполагается, что нормальные киллеры способны узнавать структуры высокомолекулярного гликопротеина, экспрессирующегося на мембранах зараженных вирусами клеток. Сближение с клеткой-мишенью и ее распознавание возможно благодаря рецепторам NK. Происходит активизация нормальных киллеров, при которой в пространство вне клеток выбрасывается содержимое гранул.
Считается, что главенствующая роль в данном процессе принадлежит цитолизину (перфорину), обладающему некоторым структурным сходством с элементом комплимента С9 (антителами к перфорину подавляется уничтожение вне клетки). Встраиваясь в мембраны клеток-мишеней, перфорин формирует трансмембранные поры, следствием чего является гибель клеток, поскольку их содержимое через эти поры вытекает. К тому же в гранулах нормальных киллеров присутствует две разновидности сериновой протеинкиназы, способной исполнять роль цитолитических факторов, однако ее влияние на NK-зависимый лизис до конца не изучена. Также в NK обнаружено присутствие устойчивого к протеинкиназам хондроитинсульфата А-протеогликана, способного защитить клетку от автолизиса. Установлено, что, распознавая мишени, NK-клетка производит распознавание, как «положительное», так и «отрицательное».
Эти клетки, как и В-клетки, образуются в красном костном мозгу.
а) На поверхности NK-клеток нет Ig-подобных рецепторов. Тем не менее с помощью рецепторов другой природы NK-клетки настроены на узнавание определенных белков на поверхности нормальных клеток.
б)
Активация NK-клеток происходит тогда, когда указанные белки изменены.
Наиболее часто такая ситуация возникает в случае опухолевых клеток и клеток,
зараженных вирусом.
Поэтому считают, что NK-клетки – важнейший элемент противоопухолевого
иммунитета, и в этом отношении их значение даже больше, чем Т-лимфоцитов.
в) Кроме того, NK-клетки имеют рецепторы к Fс-области IgG. Благодаря им NK-клетки (подобно нейтрофилам и макрофагам) атакуют и те клетки, с поверхностью которых связались антитела.
г) В гранулах NK-клеток содержится белок перфорин и протеолитические ферменты гранзимы. С их помощью и осуществляется разрушение клетки-мишени.
NK-клетки обладают рецепторами подавления цитотоксичности (от англ: killer inhibitory receptor – KIR), что отличает их от Т-киллеров. В случаях отрицательного распознавания данные рецепторы взаимодействуют на клетке-мишени с молекулой МНС класса I, вследствие чего инфицированная клетка получает сигнал к торможению цитотоксической активности. К положительному распознаванию приводит отсутствие на клетках-мишенях экспрессии молекул MHC, а также взаимодействие инфицированных клеток с NK-клетками при участии особых рецепторов NK-клетки, таких как CD69 и CD2, либо антител, связанных с ними посредством рецептора для Fc – CD16.
Процесс связывания нормальных киллеров со сформировавшими на поверхностях клеток-мишеней иммунные комплексы+антигены антителами, интерпретируют как проявления клеточной активности киллеров, другими словами, как антителозависимую клеточную цитотоксичность. Например, вирус герпеса пытается избежать распознавания Т-киллером, прибегая к подавлению экспрессии молекулы МНС класса I на поверхности зараженной клетки. В подобных случаях вирус распознает NK-клетка.
Точная природа происхождения нормальных киллеров не выяснена до сегодняшнего дня. Их генезис принято связывать с БГЛ – большими гранулярными лимфоцитами. Хотя NK и напоминает морфологически лимфобласты или лимфоциты, однако их гистогенетические связи с В- или Т-лимфоцитами не определены. Характерной особенностью нормальных киллеров является присутствие Fc-рецепторов.
Дефицит перфориновой дегрануляции NK-клеток приводит к развитию тяжелого синдрома семейного гемофагоцитарного лимфогистиоцитоза, выявляемого приблизительно в одном из 50 000 случаев.
Способные убивать другие клетки организма - опухолевые или зараженные вирусами. Естественные киллеры образуются из клеток-предшественников, которые рождаются в костном мозге. Их превращение в киллеров происходит в различных тканях и органах (лимфатических узлах, селезенке, печени, кишечнике, тимусе, матке и других), где они превращаются в варианты естественных киллеров с несколько различающимися свойствами.
Естественные киллеры - близкие родственники Т-киллеров. Те и другие представляют собой живые подвижные клетки-контейнеры, внутри которых имеются пузырьки со смертельным содержимым и на поверхности которых есть молекулярные сенсоры. С помощью сенсоров клетка-киллер распознает инфицированные или опухолевые клетки, подлежащие ликвидации.
Готовых Т-киллеров нет. Есть их предшественники - наивные с большим разнообразием распознающих сенсоров. Наивные Т-клетки не готовы убивать. Это своего рода живые заготовки. Изначально их слишком мало, поэтому, когда и если их сенсоры встретятся с инфицированной или опухолевой клеткой, заготовки начнут размножаться и одновременно приобретать свойства профессиональных Т-клеток-убийц. Этот процесс размножения и превращения занимает дни, а то и недели.
Естественные киллеры называются так потому, что готовы убивать сразу, без подготовки. Механизм действия естественного киллера такой же, как у Т-киллера: он несет в себе такие же гранулы, в которых спрятаны яды. Клетка-киллер образует герметичный контакт с клеткой-жертвой и внутрь этого герметичного просвета между клетками выделяет яд, который убивает неправильную клетку. Сама клетка-киллер защищена от этого яда.
В качестве ядов естественные киллеры используют несколько белков: перфорин, гранзим и гранулизин. Перфорин встраивается во внешнюю мембрану клетки-жертвы и образует в мембране поры, через которые проходят гранзим и гранулизин. Они входят в клетку, включают ее механизм - самоликвидации. В течение 10–20 минут клетка переварит свое содержимое до простейших молекул и упакует эти безопасные останки в небольшие мешочки, которые охотно съедят фагоциты. Так очень аккуратно, не навредив соседним, здоровым клеткам, инфицированная или опухолевая клетка самоликвидируется по команде клетки-киллера. Естественный киллер - серийный убийца, он может поразить 30–40 клеток-мишеней подряд.
Сенсоры Т-клеток и естественных киллеров узнают инфицированную или опухолевую клетку по-разному. Т-киллер распознает миниатюрные фрагменты вирусных или мутантных белков, представленные на поверхности клетки в своеобразных молекулярных витринах (молекулы MHC). Таков закон: каждая клетка организма представляет на своей поверхности элементы того, что синтезируется внутри клетки. Это необходимо, чтобы иммунитет мог обнаружить любые болезненные изменения в каждой клетке организма - признаки чужих, инфекционных молекул или собственные молекулы, существенно измененные в результате мутаций. Такие молекулярные признаки болезни нашей клетки узнает Т-киллер и убивает измененную клетку. Жестоко, но эффективно. Лучше лишиться больных клеток, чем привести организм к гибели от инфекции или опухоли.
Довольно часто инфицированные и опухолевые клетки прячут признаки болезни, не показывая на поверхности ни молекулы-витринки, ни мутантные белки, ни молекулы инфекционной природы. Эта замечательная «стелз»-стратегия вируса или опухоли делает их невидимыми для Т-клеток, и, следовательно, грозное оружие в виде Т-киллеров становится беспомощным против таких хитрых врагов. Тут на помощь приходит естественный киллер, сенсоры которого как раз и следят за тем, чтобы на поверхности каждой клетки организма обязательно были представлены молекулы-витринки. Отсутствие или существенное снижение количества MHC-молекул (витринок) на клетке рассматривается естественным киллером как признак, достаточный для смертного приговора. Такая «оголенная» клетка без паспорта на выживание должна умереть - она получает приказ на апоптоз от естественного киллера и очень аккуратно самоликвидируется.
Естественные киллеры важны для защиты от внутриклеточных инфекций, например вирусов, и для защиты от опухолей. Если этот механизм защиты нарушен, люди страдают рецидивирующими вирусными инфекциями, у них повышена вероятность возникновения опухолей. Жизнь без естественных киллеров полна болезней и риска.
Морфологически ЕК представляют собой большие гранулосодержащие лимфоциты. Характерные для них азурофильные цитоплазматические гранулы являются аналогами лизосом фагоцитирующих клеток. Однако ЕК фагоцитарной функцией не обладают. Неспецифический характер их цитотоксического действия отличает эти клетки от антигенспецифических Т-киллеров и от К-клеток, опосредующих антителозависимую цитотоксичность. Среди лейкоцитов крови человека ЕК составляют до15% (подробнее см.иммунокомпетентнык клетки).
Гуморальные факторы
Лизоцим
Лизоцим представляет собой термостабильный белок типа муколитического фермента. Он содержится в тканевых жидкостях животных и человека - в слезах, слюне, перитонеальной жидкости, плазме и сыворотке крови, в лейкоцитах, материнском молоке и др.
Лизоцим продуцируется моноцитами крови и тканевыми макрофагами. Он вызывает лизис многих сапрофитных бактерий, оказывая менее выраженное литическое действие на ряд патогенных микроорганизмов и не активен в отношении вирусов.
Механизм бактериолитического действия лизоцима состоит в гидролизе связей в полисахаридных цепях пептидогликанового слоя клеточной стенки бактерии. Это приводит к изменению ее проницаемости, сопровождающемуся диффузией клеточного содержимого в окружающую среду, и гибели клеток.
Заживление ран в области слизистых оболочек, имеющих контакт с большим количеством различных микроорганизмов, в том числе и патогенных, в известной степени объясняется наличием лизоцима.
Система комплемента
Системой комплемента называют многокомпонентную самособирающуюся систему белков сыворотки крови, которая играет важную роль в поддержании гомеостаза. Она способна активироваться в процессе самосборки, т.е. последовательного присоединения к образующемуся комплексу отдельных белков, которые называются компонентами, или фракциями комплемента. Таких фракций известно девять. Они продуцируются клетками печени, мононуклеарными фагоцитами и содержатся в сыворотке крови в неактивном состоянии.
Процесс активации комплемента может запускаться (инициироваться) двумя разными путями, получившими названия классический и альтернативный .
При активации комплемента классическим путем инициирующим фактором является комплекс антиген-антитело (иммунный комплекс). Причем антитела только двух классов IgG и IgМ в составе иммунных комплексов могут инициировать активацию комплемента.При присоединении С1 к комплексу антиген-антитело образуется фермент (С1-эстераза), под действием которого формируется энзиматически активный комплекс (С4b, С2а), называемый СЗ-конвертазой. Данный фермент расщепляет СЗ на СЗа и СЗb. При взаимодействии субфракции СЗb с С4 и С2 образуется пептидаза, действующая на С5. Если инициирующий иммунный комплекс связан с клеточной мембраной, то самособирающийся комплекс С1, С4, С2, СЗ обеспечивает фиксацию на ней активированной фракции С5, а затем С6 и С7. Последние три компонента совместно способствуют фиксации С8 и С9. При этом два набора фракций комплемента - С5а, С6, С7, С8 и С9 - составляют мемб-раноатакующии комплекс, после присоединения которого к клеточной мембране клетка лизируется из-за необратимых повреждений структуры ее мембраны
Таким образом, при активации комплемента классическим путем ключевыми компонентами являются С1 и СЗ, продукт расщепления которого СЗb активирует терминальные компоненты мембраноатакующего комплекса (С5-С9).
Особенность альтернативного пути активации комплемента (ключевым компонентом является СЗ,) состоит в том, что инициация может происходить без участия комплекса антиген-антитело за счет полисахаридов и липополисахаридов бактериального происхождения - липополисахарида (ЛПС) клеточной стенки грамотрицательных бактерий, поверхностных структур вирусов, иммунных комплексов, включающих IgА и IgЕ.
В альтернативном пути активации комплемента необходимо участие сывороточного белка, названного пропердином, который активен лишь в присутствии ионов М§ 2+.
Как видно из описанных каскадов реакций, многие компоненты комплемента при активации проявляют активность протеиназ или эстераз, работающих только внутри системы. При этом в процессе активации комплемента появляются продукты протеолиза компонентов С4, С2, СЗ и С5. Одни из них (фрагменты С4b, С2b, СЗb, С5b) участвуют непосредственно в самосборке и активации самой системы комплемента. В отличие от них низкомолекулярные фрагменты СЗа и С5а, названные анафилатоксинами, по совокупности биологических эффектов -освобождение гистамина из тучных клеток, хемотаксис фагоцитов, нарушение проницаемости сосудов, сокращение гладких мышц и др. -играют существенную роль в патогенезе болезней иммунных комплексов и других заболеваний, при которых резко усиливаются связывание и активация комплемента в организме.
Фракции комплемента при их активации классическим или альтернативным путем выполняют ряд эффекторных функций:
- мембраноатакующий комплекс опосредует цитолитическое и цитотоксическое действие специфических антител на клетки-«мишени»;
- анафилотоксины участвуют в иммунопатологических реакциях;
- компоненты комплемента изменяют физико-химические свойства иммунных комплексов; уменьшают степень агрегации и эффективность их фагоцитоза;
- фрагмент СЗb способствует связыванию и захвату иммунных комплексов фагоцитами, опсонизируя объекты фагоцитоза;
- фрагменты СЗb, С5а , обладающие свойствами хемоаттрактантов, участвуют в развитии воспаления.
Белки острой фазы
В ходе развития защитных воспалительных реакций после инфицирования или повреждения, а также при онкогенезе и беременности в организме начинается усиленная продукция белков острой фазы. Так назвали большую группу белков, обладающих антимикробным действием, способствующих фагоцитозу, активации комплемента, формированию и ликвидации воспалительного очага. Белки острой фазы продуцируются в печени при действии цитокинов, в основном ИЛ-1, ФНО-а и ИЛ-6. Основную массу белков острой фазы составляют С-реактивный белок и сывороточные амилоиды А и Р. Другие группы белков острой фазы составляют факторы свертывания крови, металлосвязывающие белки, ингибиторы протеаз, компоненты комплемента и некоторые другие. При воспалении содержание в крови большинства белков многократно возрастает, и определение С-реактивного белка входит в число общепринятых методов диагностики воспалительных процессов.
С-реактивный белок получил название вследствие способности присоединять и преципитировать С-полисахарид. Далее было установлено, что С-реактивный белок (СРБ) присоединяется к фосфатидилхолину - компоненту клеточной мембраны любых клеток. Он способен присоединяться к микроорганизмам, активированным лимфоцитам, поврежденным клеткам разных тканей, активируя при этом комплемент. Присоединяясь к нейтрофильным фагоцитам, СРБ усиливает фагоцитоз и элиминацию объектов фагоцитоза. Вместе с этим СРБ подавляет продукцию супероксида и освобождение из гранул фагоцитов ферментов, защищая тем самым ткани от повреждения.
Сывороточный амилоид Р близок по структуре к СРБ, обладает способностью к активации комплемента.
Сывороточный амилоид А - липопротеин, обладающий способностью к хематтракции нейтрофилов, моноцитов и лимфоцитов. Повышенный уровень этого белка в крови наблюдается при туберкулезе и ревматоидном артрите.
К факторам свертывания крови относятся фибриноген и фактор фон Виллебранда, способствующие образованию сгустков в сосудах зоны воспаления.
Другую группу белков острой фазы составляют белки, связывающие железо - гаптоглобин, гемопексин, трансферрин - и тем самым препятствующие размножению микроорганизмов, нуждающихся в этом элементе.
Уровень ингибиторов протеаз в крови возрастает при воспалении в 2-3 раза. Антитрипсин, антихимотрипсин и макроглобулин препятствуют разрушению тканей протеазами нейтрофилов в очагах воспаления.
Цитокины
Медиаторы межклеточных взаимодействий, именуемые цитокинами , определяют как реакции врожденного и приобретенного иммунитета, так и ряд других жизненно необходимых функций организма, значение которых выходит за рамки иммунологии.
Цитокинами называют гормоноподобные медиаторы , продуцируемые разными клетками организма и способные повлиять на функции других или этих же групп клеток. Цитокины - пептиды или гликопротеиды, действующие как аутокринные, паракринные или межсистемные сигналы. Цитокины формируются как активированными или поврежденными клетками, так и клетками без дополнительной стимуляции. Регуляторами продукции цитокинов могут быть другие цитокины, гормоны, простагландины, антигены и многие другие агенты, воздействующие на клетку. Некоторые закономерности цитокиновой регуляции могут быть сформулированы следующим образом:
· Каждая клетка продуцирует разные цитокины.
· Каждый цитокин может быть продуктом разных видов клеток.
· Один цитокин обладает разными эффектами действия.
· Цитокин может стимулировать или подавлять активность клетки-«мишени».
· Каждая клетка имеет рецепторы к разным цитокинам и, следовательно, может подвергаться одновременному или разновременному воздействию нескольких цитокинов.
· Взаимодействие нескольких цитокинов на клетку может быть синергичным или антагонистичным.
· Рецепторы цитокинов могут отделяться от клетки и взаимодействовать с цитокинами вне клетки. В этих условиях свободные рецепторы связывают соответствующие цитокины, что препятствует их контакту с клеточными рецепторами.
· Цитокины, их рецепторы на клетках и во внеклеточных средах составляют сложную функциональную сеть, результат действия которой зависит от взаимодействия этих факторов между собой и другими цитокинами.
· Цитокины действуют в низких концентрациях порядка 0,001 мкг/мл. Для воздействия на клетку достаточно, чтобы цитокин связался с 10% клеточных рецепторов к нему.
Цитокины составляют обширный класс медиаторов различного происхождения, обладающих разными свойствами. Их классификация носит условный характер, так как многие их них обладают одновременно несколькими свойствами и могут быть отнесены к разным группам. Цитокины объединены в группы в зависимости от их происхождения (лимфокины, монокины), от характера эффекта (провос-палительные, противовоспалительные). Цитокины, регулирующие взаимодействия лейкоцитов между собой и другими клетками, называют интерлейкинами (ИЛ). Большинство цитокинов именуется по действию, которое было впервые обнаружено.
Группа интерлейкинов включает 17 цитокинов, большинство из которых играет ключевую роль в развитии специфического иммунного ответа.
Продуцируемый макрофагами и моноцитами ИЛ-1 обуславливает пролиферацию лимфоцитов при индукции иммунного ответа, а также активирует Т-лимфоциты, увеличивает продукцию антител. ИЛ-1 действует на нейтрофилы, способствуя хемотаксису, активации метаболизма, выходу из клеток лизоцима и лактоферрина. Этот цитокин - эндогенный пироген, вызывающий лихорадку за счет воздействия на гипоталамический центр терморегуляции.
ИЛ-2 продуцируется Т-лимфоцитами (в основном Тх1), активированными антигеном, собственным ИЛ-2, другими интерлейкинами: ИЛ-1, ИЛ-6, интерфероном, фактором некроза опухоли (ФНО). Без ИЛ-2 позитивный иммунный ответ на антиген не возникает, стимулированный антигеном лимфоцит гибнет, что может привести к развитию толерантности к данному антигену. Интерлейкины ИЛ-4 и ИЛ-10 подавляют продукцию ИЛ-2. Это способствует развитию эффекторов гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ), формированию киллеров из СD8 + лимфоцитов, усилению действия ЕК. Все это стимулирует противоопухолевый иммунитет и позволяет рекомендовать рекомбинантный ИЛ-2 для лечения онкологических больных.
Факторы роста - большая группа гликопротеинов, контролирующих пролиферацию и созревание потомков стволовой кроветворной клетки. Они продуцируются разными видами клеток и действуют на разные этапы их развития.
Колониестимулирующие факторы (КСФ) получили свое название благодаря тому, что было обнаружено их свойство способствовать дифференцировке введенных мышам клеток костного мозга в зрелые гранулоциты и/или моноциты с образованием в селезенке животных колоний соответствующих клеток. Гранулоцитарный КСФ обеспечивает дифференцировку предшественников гранулоцитов в зрелые нейтрофи-лы. Моноцитарный КСФ способствует созреванию моноцитов и макрофагов из клеток-предшественников, а гранулоцитарно-моноцитарный КСФ стимулирует формирование гранулоцитов и макрофагов из их общих предшественников.
Интерфероны (ИФ) были открыты как противовирусные агенты. Затем были обнаружены их иммунорегулирующие свойства. Существует три разновидности ИФ
У здоровых людей ИФ в крови не обнаруживаются. Их уровень повышен при красной волчанке, ревматоидном артрите, склеродермии. Наличие интерферона в крови этих больных увеличивает резистентность к вирусным инфекциям и опухолям, но неблагоприятно сказывается на развитии аутоиммунных процессов, свойственных этим заболеваниям.
Препараты интерферонов используются для лечения лейкемий и некоторых других онкологических процессов. Для усиления противовирусной защиты используют средства, повышающие продукцию собственного интерферона (интерфероногены). В качестве индукторов эндогенного интерферона применяют противовирусные вакцины, препараты РНК и ДНК.
Цитотоксины. Такое название получили цитокины группы факторов некроза опухолей (ФНО) , который был впервые обнаружен как компонент сыворотки крови животных, стимулированных бактерийным токсином, вызывающий некротические процессы в опухолевой ткани. ФНО служит медиатором ответа организма на микробную инвазию. Эндотоксины (липиполисахариды) микробов стимулируют клетки-продуценты к образованию ФНО, который, в свою очередь, обеспечивает хемотаксис фагоцитов в инфицированную ткань и усиливает фагоцитоз возбудителей. В настоящее время известно, что ФНО составляют по крайней мере две группы (альфа и бета) медиаторов, продуцируемых активированными макрофагами, естественными киллерами, а также лимфоцитами, нейтрофилами и тучными клетками.
Завершая рассмотрение цитокинов и их эффектов, необходимо подчеркнуть, что в механизмах иммунитета участвуют две группы противоположно действующих цитокинов. Одна группа - провоспалительные цитокины (ИЛ-1, ИЛ-6, ИЛ-8 и другие лимфокины, ФНО-а, а также ИФ), стимулируя разные клетки и механизмы, усиливают врожденную неспецифическую защиту, воспаление, способствуют развитию специфических иммунных реакций. Вторая функциональная группа - противовоспалительные цитокины (ИЛ-4, ИЛ-10, ИЛ-13, ТРФ) подавляет развитие как неспецифических, так и специфических иммунных реакций.
Адгезины. Среди факторов, определяющих прямые контакты клеток организма между собой и с представителями микрофлоры, существенную роль играют молекулы адгезии или адгезины. Предполагается, что в эволюции живого появление молекул адгезии сделало возможным возникновение многоклеточных организмов. Более 90% микробов, составляющих нормальную микрофлору человеческого организма, обитают в нем благодаря молекулам адгезии. Блокирование адгезии патогенных микроорганизмов к клеткам и тканям организма - один из основных путей антимикробной защиты. Молекулы адгезии экспрессируются на мембранах клеток, определяя их способность контактировать с другими клетками и неклеточными субстратами. Рецепторами молекул адгезии в организме могут быть другие молекулы адгезии на поверхности клеток, углеводные компоненты мембран, иммуноглобулины. Количество молекул адгезии и рецепторов к ним увеличивается при антигенной или любой другой активации клеток.
В ходе иммунного ответа молекулы адгезии определяют контакты антиген-представляющих клеток с лимфоцитами и лимфоцитов между собой. Молекулы адгезии входят в состав рецепторов иммунокомпетентных клеток и определяют тропность клеток иммунной системы к определенным тканям или органам - хоминг-эффект (англ. Ноте - дом).
Молекулы адгезии условно разделяют на группы: селектины, интегрины, молекулы суперсемейства иммуноглобулинов .
Селектины - семейство поверхностных молекул адгезии, определяющие присоединение клеток к углеводным компонентам других структур.
Интегрины - большая группа молекул, определяющая взаимодействия белок-белок.Интегрины играют роль в межклеточных контактах при воспалении, реакциях иммунитета, аутоиммунных повреждениях тканей, процессах репарации. Интегрины экспрессируются на клетках опухолей и играют роль в процессах метастази-рования. Их определение используется для диагностики разных видов злокачественных опухолей.
К молекулам суперсемейства иммуноглобулинов относится более 15 вариантов молекул, которые обозначаются заглавными латинскими буквами, соответствующими обозначению их функции: адгезии клетка-клетка или белок-белок.
К молекулам адгезии суперсемейства иммуноглобулинов относятся СD4 + , СD8 + молекулы Т-лимфоцитов, определяющие их контакты со структурами МНС II или I класса и дифференцировку этих двух классов Т-клеток между собой.
Адгезины формально не относятся к системе цитокинов, но обладают многими сходными с ними функциями и участвуют в межклеточной кооперации.
Белки теплового шока
При воздействии на микробные и эукариотические клетки неблагоприятных стрессовых факторов - повышенной температуры, голодания, токсинов, тяжелых металлов, вирусов, в них формируются защитные белки. Они получили название белков теплового шока , так как они были впервые обнаружены при тепловом воздействии на клетки.В результате повышаются термоустойчивость и резистентность клеток за счет защиты и коррекции поврежденных стрессом клеточных белков
Помимо поддержания резистентности клеток к шоковым воздействиям БТШ принимают участие в эндоцитозе вирусных частиц, процессинге антигенов, входят в состав некоторых рецепторных комплексов (стероидные рецепторы).
Естественные киллеры (NK) составляют 10-20% МЛПК и имеют морфологию больших гранулярных лимфоцитов. NK относятся к системе врожденного иммунитета и, в отличие от Т-киллеров, не требуют каскада реакций антигенной презентации. Сигналом для направленного киллинга может быть измененный или ассоциированный с чужеродным белком (вирусная трансформация клетки) МНС, либо отсутствие (снижение) его экспрессии на клетке собственного организма. Степень экспрессии МНС характеризуется эффектом обратной регуляции.
То есть, чем меньше МНС экспонировано на поверхности клетки, тем выше вероятность активации NK. Положительным стимулом для активации NK может стать появление эмбриональных рецепторов на поверхности клетки. Оба эти момента важны для функционирования противоопухолевого иммунитета, поскольку опухолевые клетки в процессе своей трансформации могут утрачивать МНС, терять тканевую специфичность и даже приобретать свойства эмбриональных клеток (низкодифференцированные эмбриокарциномы) и таким образом ускользать от иммунологического надзора.
NK принимают активное участие практически во всех реакциях иммунной системы - в регуляции процессов пролиферации, дифференцировки и элиминации стареющих соматических клеток организма, модуляции клеток врожденного иммунитета, в супрессии или активации В-лимфоцитов, в пролиферации и индукции супрессорнои активности Т-лимфоцитов, в созревании предшественников CTL, генерации вирус-специфических CTL, созревании претимоцитов и тимоцитов.
Иммунофенотипически NK являются CD3, TCR (а, р, у, б), CD16", CD56. 95% периферической крови представлены CD56/СD16-клетками, обладающими высокой цитотоксичностью. Другая субпопуляция NK относится к регуляторным CD56/CD16 -экспрессирующим клеткам, большинство которых (75%) локализуется в лимфатических узлах, где под воздействием NK, по мнению ряда исследователей, происходит созревание ДК. Кроме того, на поверхности NK экспрессируются антигены, характерные для Т-лимфоцитов (CD2, CD7, CD8), моноцитов/макрофагов (CD1/CD18). NK также экспрессируют селектины, В-интегрины, VLA-4, -5, -6 и антигенные детерминанты к гликопротеидам.
Через CD7 осуществляются повышение внутриклеточной концентрации ионов кальция, перекрестное реагирование с CD25, CD71, CD54, HLA-DR, стимуляция секреции IFN-y, повышается цитотоксическая активность NK, инициируется пролиферация NK и опосредуется адгезия к фибронектину CD11/CD18 опосредуют внеклеточную цитотоксич-ность и способствуют адгезии с клетками-мишенями. VLA-4, -5, -6 способствуют адгезии к фибронектину и ламинину, опосредуют антите-лозависимую цитотоксичность и инициируют синтез IL-2. Антиген CD57 при его активации опосредует адгезию с клеткой-мишенью и активируют литический потенциал NK. В последние годы были еще идентифицированы молекулы, активирующие и ингибирующие активность NK. К ингибирующим рецепторам относят: KIR2DL, KIR3DL, CD94/ NKG2A(CD159а), активирующие рецепторы представлены: CD85J, CD85d, NKp30, KIR2DS, KIR2DL, CD94/NKG2C, NKp44, NKG2D, CD2.
Показано, что связывание NK с МНС I блокирует лизис клеток-мишеней. Такая ингибиция связана с цитоплазматическим доменом NK-рецептора ITIM (immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motif) Однако некоторые члены семейства рецепторов NK (KIR2DS, Ly49D/H nCD94/ NKG2C) не содержат ITIMs В то же время они ассоциированы с адаптерной молекулой DAP12, которая содержит домен ITAM (immunoreceptor tyrosine-based activating motif), способный активировать NK. Таким образом, активность NK регулируется балансом между активирующими и ингибирующими сигналами.
Источником NK
, циркулирующих в крови, является костный мозг. В настоящее время вопрос о точной принадлежности NK к какой-либо популяции иммунокомпетентных клеток остается открытым, поскольку NK эксрессируют антигены, характерные для Т-лимфоцитов и моноцитов/макрофагов. В то же время NK рассматривают не только как самостоятельную субпопуляцию, но и как этап дифференцировки зрелых лимфоцитов (незрелые лимфоциты еще не приобретшие свойств специфического иммунитета). Известно, что процесс дифференцировки может быть и обратным: из зрелых лимфоцитов при инкубации с ИЛ-2 могут быть получены так называемые NK-ЛАК-клетки.
К факторам, активирующим активность NK
, относится большинство цитокинов: IL-1-4, IL-6-8, IL-10, IL-12, IL-15, IL-18, а также IFN-a, P, у.
На стадии лизиса существенную роль играют продукты секреции азурофильных цитолитических гранул из цитоплазмы NK (перфоринов, сериновых эстераз и протеогликанов), что приводит к формированию цилиндрических трансмембранных пор и к последующему осмотическому лизису клеток-мишеней. Помимо этого в процессе цитолиза значимая роль отводится цитолитическому фактору NK и TNF-a.
NK клетки способствуют развитию адаптивного иммунного ответа через продукцию цитокинов и хемокинов 1 и 2 типа. Секреция этих факторов, активированными NK клетками, ведет не только к созреванию ДК, но и к дифференцировке Т- и В-лимфоцитов. Недавно в экспериментах Zingoni А. и коллег было выявлено, что активированные NK клетки способствуют TCR-зависимой пролиферации покоящихся аутологичных СD4"-Т-клеток под воздействием костимулирующих молекул, суперсемейства иммуноглобулинов и TNF. Эти данные раскрывают новую связь между врожденным и адаптивным иммунитетом.